Trenutno su infekcije COVID-19 složene i raznolike, a detekcija virusne nukleinske kiseline, kao glavna brza dijagnostička mjera, posebno je važna. Trenutno, precizne, brze i intuitivne dijagnostičke tehnologije nukleinskih kiselina se pojavljuju u beskrajnom toku, od PCR do tehnologije izotermne amplifikacije posredovane petljom do RPA tehnologije. Nema sumnje da su ove nove tehnologije uvelike skratile ciklus otkrivanja bolesti i da se mogu implementirati u roku od nekoliko desetina minuta. Brzo pojačanje i određivanje rezultata nukleinskih kiselina također omogućavaju kućnu upotrebu testiranja nukleinskih kiselina.
Ekstrakcija nukleinske kiseline je prvi korak u detekciji nukleinske kiseline. Kvalitet i integritet ekstrakcije direktno utiču na kliničko istraživanje ili dijagnozu. Thetradicionalna ekstrakcija nukleinske kiselinemetoda je metoda magnetne perle. Koraci operacije su: prije sakupljanja uzorka, potrebno je dodati dovoljnu količinu otopine za lizu u epruvetu s reagensom, sakupiti uzorak i zatim ga staviti u otopinu za lizu za lizu; nakon što je liza završena, koristite uređaj za pipetiranje. Kvantitativno apsorbirajte dovoljno magnetnih kuglica i dodajte ih u otopinu za lizu za adsorpciju nukleinske kiseline; koristiti opremu ili magnetni uređaj za uklanjanje magnetnih kuglica iz reakcijske cijevi; stavite magnetne kuglice adsorbovane nukleinskom kiselinom u novu epruvetu i dodajte dovoljnu količinu eluenta Izvršite eluiranje; odvojiti magnetne kuglice i dobiti pročišćeni rastvor uzorka nukleinske kiseline; koristiti pipetu ili uređaj za pipetiranje da izvučete uzorak iz eluirane reakcione otopine; primijeniti uzorak na naknadnu detekciju.
Kombinovana epruveta reagensa za ekstrakciju nukleinske kiseline, uključujući prethodno instaliranu epruvetu rastvora za lizu (1), kapicu za prenos (2), unapred instaliranu epruvetu za rastvor za pranje (3), zatvarač za otvor za uzorkovanje (4) i magnetni boca za dodavanje rastvora perli (5) i podloga (6);
Predinstalirana cijev za rastvor za lizu (1) ima otvoreni gornji kraj, postavljena je na podlogu (6) i napunjena rastvorom za lizu;
Poklopac za prijenos (2) uključuje glavno tijelo poklopca za prijenos i prvi poklopac s kopčom. Gornji i donji krajevi glavnog tijela poklopca za prijenos su otvoreni, a donji krajni otvor može se odvojivo zatvoriti gornjim krajnjim otvorom unaprijed instalirane cijevi za lizat (1). spoj, njegov gornji krajnji otvor je uklonjivo spojen sa prvim poklopcem kopče, koji je preko spojnih rebara spojen sa vanjskim zidom tijela prijenosnog poklopca; trajni magnet je ugrađen u prvi poklopac kopče;
Gornji i donji krajevi unaprijed postavljene cijevi za tečnost za pranje (3) su otvoreni, a gornji krajni otvor može se odvojivo i zaptivnim spojiti na donji kraj otvora kućišta poklopca za pranje, a donji kraj otvora je rupa za uzorkovanje , a rupa za uzorkovanje je spojena na Zaptivni poklopac (4) otvora za uzorkovanje je uklonjivo i zaptivno spojen; prethodno postavljena cijev za tečnost za pranje (3) izrađena je od materijala koji se može presavati i napunjena je tekućinom za pranje;
Poklopac za brtvljenje otvora za uzorkovanje (4) je postavljen na potpornu osnovu (6), a prethodno postavljena cijev tečnosti za pranje (3) je pričvršćena;
Boca za uzorkovanje tekućine s magnetnim perlicama (5) napunjena je tekućinom za magnetne kuglice.
Kao dalje poboljšanje, epruveta reagensa za ekstrakciju nukleinske kiseline dodatno uključuje drugu kapicu sa kopčom, koja se može odvojiti sa gornjim krajnjim otvorom unapred instalirane cevi za rastvor za lizu (1); druga kapa sa kopčom Kapa sa kopčom je povezana sa spoljnim zidom unapred instalirane cevi za lizat (1) preko spojnih rebara.
Kao dodatno poboljšanje, na vanjskom zidu glavnog tijela prijenosnog poklopca predviđen je žljeb protiv klizanja.
Kao daljnje poboljšanje, unutar glavnog tijela poklopca za prijenos je predviđena struktura pera, a struktura pera može formirati interferencijski spoj sa unutrašnjim zidom gornjeg otvora cijevi za predugradnju lizata (1).
Kao daljnje poboljšanje, na gornjem otvoru kućišta poklopca prijenosa je predviđena otvora, u prvom poklopcu kopče je predviđena upuštena rupa, a izbočina i upuštena rupa su odvojivo zakačeni.
Kao dodatno poboljšanje, odvojivi zaptivni spoj je navojni spoj.
Kao daljnje poboljšanje, rebra su predviđena u prvom poklopcu kopče tako da se trajni magneti uklapaju u prvi poklopac kopče u interferentnom spoju.
Kao daljnje poboljšanje, otvor gornjeg kraja cijevi za predugradnju tekućine za pranje (3) ima stepenicu koja ispunjava zahtjeve zaptivanja aluminijske folije.
Metoda primjene gornje epruvete s kombinacijom reagensa za ekstrakciju nukleinske kiseline uključuje sljedeće korake:
S1, otvorite poklopac za transfer (2) koji je zapečaćen na prethodno postavljenoj epruveti (1) rastvora za lizu, stavite sakupljeni uzorak u telo unapred instalirane epruvete rastvora za lizu (1) i izvršite reakciju lize;
S2, nakon reakcije lize, dodati rastvor magnetnih kuglica u bocu za prethodno pakovanje rastvora magnetnih kuglica (5) u epruvetu za prethodno pakovanje rastvora za lizu (1) i dobro protresti;
S3, ponovo zapečatite kapicu za prijenos 2 na unaprijed instaliranu cijev za lizat (1), pričvrstite prvu kopču kapice za prijenos (2) na gornji otvor tijela prijenosnog poklopca i stavite unaprijed instaliranu cijev za lizat (1 ) Okrenite ga naopako da bi reakciona tečnost potonula i koristite trajni magnet da uhvatite magnetne kuglice koje su apsorbovale nukleinsku kiselinu;
S4, nakon što su magnetne kuglice adsorbirane, olabavite kapicu za prijenos (2) s unaprijed postavljene cijevi (1) otopine za lizu i povežite prenesenu kapicu (2) sa adsorbiranim magnetnim perlama na prethodno postavljenu otopinu za ispiranje. instalirana cijev. (3), otvorite prvi poklopac kopče na poklopcu za prijenos (2) da odvojite trajni magnet i oslobodite magnetne perle. Protresite prethodno postavljenu cijev tečnosti za pranje (3) i očistite magnetne perle na poklopcu za prijenos (2). elucija;
S5, nakon što je nukleinska kiselina potpuno eluirana, olabavite zaptivni poklopac (4) otvora za uzorkovanje, pritisnite napunjenu epruvetu (3) otopine za pranje, a zatim dodajte uzorak kap po kap.
Kao daljnje poboljšanje, korak S4 također uključuje pričvršćivanje druge kapice sa kopčom na unaprijed instaliranu cijev za lizat (1).